1. Ce este cultura celulară?
Cultura celulară se referă la îndepărtarea celulelor de la animale sau plante și apoi creșterea lor într-un mediu artificial favorabil.Celulele pot fi luate direct din țesut și descompuse prin mijloace enzimatice sau mecanice înainte de cultivare, sau pot fi derivate din linii celulare sau linii celulare stabilite.
2. Ce este cultura primară?
Cultura primară se referă la etapa de cultură după ce celulele sunt separate de țesut și proliferează în condiții adecvate până când ocupă toate substraturile disponibile (adică ajung la confluență).În această etapă, celulele trebuie să fie subcultivate prin transferul lor într-un nou recipient cu mediu de creștere proaspăt pentru a oferi mai mult spațiu pentru creșterea continuă.
2.1 Linie celulară
După prima subcultură, cultura primară se numește linie celulară sau subclonă.Liniile celulare derivate din culturile primare au o durată de viață limitată (adică sunt limitate; vezi mai jos), iar pe măsură ce trec, domină celulele cu cea mai mare capacitate de creștere, rezultând un anumit grad de genotip în populație în concordanță cu fenotipul.
2.2 Tulpina celulară
Dacă o subpopulație a unei linii celulare este selectată pozitiv din cultură prin clonare sau altă metodă, linia celulară va deveni o tulpină celulară.Tulpinile de celule dobândesc, de obicei, modificări genetice suplimentare după începerea liniei parentale.
3.Linii celulare limitate și continue
Celulele normale se divid de obicei doar de un număr limitat de ori înainte de a-și pierde capacitatea de a prolifera.Acesta este un eveniment determinat genetic numit senescență;aceste linii celulare se numesc linii celulare finite.Cu toate acestea, unele linii celulare devin nemuritoare printr-un proces numit transformare, care poate avea loc spontan sau poate fi indus de substanțe chimice sau viruși.Când o linie celulară finită suferă o transformare și capătă capacitatea de a se diviza la infinit, ea devine o linie celulară continuă.
4.Condiția de cultură
Condițiile de cultură ale fiecărui tip de celule sunt foarte diferite, dar mediul artificial pentru cultivarea celulelor este întotdeauna compus dintr-un recipient adecvat, care conține următoarele:
4.1 Substrat sau mediu de cultură care furnizează nutrienți esențiali (aminoacizi, carbohidrați, vitamine, minerale)
4.2 Factori de creștere
4.3 Hormoni
4.4 Gaze (O2, CO2)
4.5 Mediu fizic și chimic reglementat (pH, presiune osmotică, temperatură)
Majoritatea celulelor sunt dependente de ancoraj și trebuie cultivate pe un substrat solid sau semisolid (cultură aderă sau monostrat), în timp ce alte celule pot crește plutind în mediu (cultură în suspensie).
5.Cryoconservare
Dacă există celule în exces în subcultură, acestea trebuie tratate cu un agent de protecție adecvat (cum ar fi DMSO sau glicerol) și depozitate la o temperatură sub -130°C (crioconservare) până când sunt necesare.Pentru mai multe informații despre subcultura și crioconservarea celulelor.
6.Morfologia celulelor în cultură
Celulele din cultură pot fi împărțite în trei categorii de bază în funcție de forma și aspectul lor (adică morfologie).
6.1 Celulele fibroblastelor sunt bipolare sau multipolare, au o formă alungită și cresc atașate de substrat.
6.2 Celulele epiteliale sunt poligonale, au o dimensiune mai regulată și sunt atașate la matrice în foi distincte.
6.3 Celulele asemănătoare limfoblastelor sunt sferice și de obicei cresc în suspensie fără a se atașa de suprafață.
7.Aplicarea culturii celulare
Cultura celulară este unul dintre principalele instrumente utilizate în biologia celulară și moleculară.Oferă un sistem model excelent pentru studierea fiziologiei normale și a biochimiei celulelor (cum ar fi cercetarea metabolică, îmbătrânirea), efectele medicamentelor și compușilor toxici asupra celulelor, precum și mutageneza și efectele carcinogene.De asemenea, este utilizat pentru screening-ul și dezvoltarea medicamentelor și pentru fabricarea pe scară largă a compușilor biologici (cum ar fi vaccinuri, proteine terapeutice).Principalul avantaj al utilizării culturii celulare pentru oricare dintre aceste aplicații este consistența și reproductibilitatea rezultatelor care pot fi obținute folosind un lot de celule clonate.
Ora postării: 03-jun-2019