1. Alegerea liniei celulare potrivite
Atunci când alegeți linia celulară adecvată pentru experiment, vă rugăm să luați în considerare următoarele criterii:
a.Specie: Liniile celulare non-umane și non-primate au de obicei mai puține restricții de biosecuritate, dar în cele din urmă experimentul dvs. va determina dacă să folosiți o cultură a unei anumite specii.
b. Caracteristici: Care este scopul experimentului dvs.?De exemplu, liniile celulare derivate din ficat și rinichi pot fi mai potrivite pentru testarea toxicității.
c. Limitat sau continuu: deși alegerea dintr-o linie celulară limitată vă poate oferi mai multe opțiuni pentru a exprima funcția corectă, liniile celulare continue sunt în general mai ușor de clonat și de întreținut.
d.Normale sau transformate: Liniile celulare transformate au de obicei o rată de creștere mai mare și o eficiență de însămânțare mai mare, sunt continue și necesită mai puțin ser în mediul de cultură, dar fenotipul lor a suferit modificări permanente prin transformarea genetică.
e. Condiții și caracteristici de creștere: Care sunt cerințele dumneavoastră pentru viteza de creștere, densitatea de saturație, eficiența clonării și capacitatea de creștere a suspensiei?De exemplu, pentru a exprima proteinele recombinante cu randamente ridicate, poate fi necesar să selectați linii celulare care au rate rapide de creștere și capacitatea de a crește în suspensie.
f.Alte criterii: Dacă utilizați o linie celulară limitată, există suficient stoc disponibil?Linia celulară este pe deplin caracterizată sau trebuie să o verificați singur?Dacă utilizați o linie celulară anormală, există o linie celulară normală echivalentă care poate fi folosită ca control?Linia celulară este stabilă?Dacă nu, cât de ușor este să-l clonezi și să generezi suficient stoc congelat pentru experimentul tău?
2.Obține linii celulare
Vă puteți construi propria cultură din celule primare sau puteți alege să cumpărați culturi de celule consacrate de la furnizori comerciali sau non-profit (adică bănci de celule).Furnizorii de renume furnizează linii celulare de înaltă calitate care au fost testate cu atenție pentru integritate și se asigură că cultura este lipsită de contaminanți.Vă recomandăm să nu împrumutați culturi de la alte laboratoare deoarece acestea prezintă un risc ridicat de contaminare a culturilor celulare.Indiferent de sursa sa, vă rugăm să vă asigurați că toate liniile celulare noi au fost testate pentru contaminarea cu micoplasmă înainte de a începe să îl utilizați.
Ora postării: 01-feb-2023